羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒,其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過酶標儀測定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化,即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。
價格:¥15.00
規(guī)格:反應
貨號:ST1015
品牌:LEAGENE
服務介紹:
羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒,其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過酶標儀測定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化,即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
ST1015 | 羥自由基清除率檢測試劑盒 | 反應 | 15元 |
實驗流程:
1、準備樣品:
①植物樣品:取正?;蚰婢诚碌男迈r植物組織,清洗干凈,擦干,切碎,迅速稱取,按1~1.5g樣品:4.5ml 蒸餾水的比例勻漿或研磨,室溫靜置4h,離心取上清
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可用于該試劑盒的測定
③高活性樣品:如果樣品中含有較高濃度的羥自由基,可用蒸餾水進行恰當?shù)南♂尅?/span>
2、·OH加樣:按照下表設置空白管、未損傷管、損傷管、對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,然后,置各管于37℃水浴鍋保溫1h;如果樣品中的羥自由基(·OH)濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置平行管。
加入物(單位:ml) | 空白管 | 未損傷管 | 損傷管 | 對照管 | 測定管 |
鄰二氮菲溶液 | — | 0.15 | 0.15 | — | 0.15 |
OH Assay Buffer | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
亞鐵顯色液 | — | 0.1 | 0.1 | — | 0.1 |
蒸餾水 | 0.8 | 0.55 | 0.45 | 0.7 | 0.35 |
待測樣品 | — | — | — | 0.1 | 0.1 |
氧化劑 | — | — | 0.1 | — | 0.1 |
·OH測定:取96孔板,將各管溶液依次吸取250ul加至96孔板中,用酶標儀檢測530~540nm處各孔吸光度值,依次記為A0、A1、A2、A3`、A3。
實驗結果:
全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運輸要求:
1、動植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。
2、血清樣本(干冰運輸)
全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運輸)
可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
4、細胞樣本
貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!