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手動生化

服務詳情

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羥自由基清除率(檢測服務)

羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒,其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過酶標儀測定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化,即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。

價格:¥15.00

規(guī)格:反應

貨號:ST1015

品牌:LEAGENE

服務介紹:

羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒,其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過酶標儀測定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化,即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1015

羥自由基清除率檢測試劑盒

反應

15

實驗流程:

1、準備樣品:

植物樣品:取正?;蚰婢诚碌男迈r植物組織,清洗干凈,擦干,切碎,迅速稱取,按1~1.5g樣品:4.5ml 蒸餾水的比例勻漿或研磨,室溫靜置4h,離心取上清

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可用于該試劑盒的測定

高活性樣品:如果樣品中含有較高濃度的羥自由基,可用蒸餾水進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2、·OH加樣:按照下表設置空白管、未損傷管、損傷管、對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,然后,置各管于37℃水浴鍋保溫1h;如果樣品中的羥自由基(·OH)濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置平行管。

加入物(單位:ml)

空白管

未損傷管

損傷管

對照管

測定管

鄰二氮菲溶液

0.15

0.15

0.15

OH   Assay Buffer

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

亞鐵顯色液

0.1

0.1

0.1

蒸餾水

0.8

0.55

0.45

0.7

0.35

待測樣品

0.1

0.1

氧化劑

0.1

0.1

·OH測定:取96孔板,將各管溶液依次吸取250ul加至96孔板中,用酶標儀檢測530~540nm處各孔吸光度值,依次記為A0、A1、A2、A3`、A3。

實驗結果:

全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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