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手動生化

服務(wù)詳情

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植物根系活力(檢測服務(wù))

測定植物根系活力時,以TTC為底物,保溫1~4小時,根系中脫氫酶能夠還原TTC并生成不溶于水的紅色TTF,再用有機溶劑(乙酸乙酯或丙酮等)將其從根中提取出來,用分光光度計或酶標(biāo)儀檢測485nm處吸光度,進而計算出TTC的還原量,以該還原量表示脫氫酶活性,并作為植物根系活力的指標(biāo),該試劑盒主要用于定量測定植物的根系活力或脫氫酶活性。

價格:¥15.00

規(guī)格:反應(yīng)

貨號:ST1515

品牌:LEAGENE

服務(wù)介紹:

       測定植物根系活力時,以TTC為底物,保溫1~4小時,根系中脫氫酶能夠還原TTC并生成不溶于水的紅色TTF,再用有機溶劑(乙酸乙酯或丙酮等)將其從根中提取出來,用分光光度計或酶標(biāo)儀檢測485nm處吸光度,進而計算出TTC的還原量,以該還原量表示脫氫酶活性,并作為植物根系活力的指標(biāo),該試劑盒主要用于定量測定植物的根系活力或脫氫酶活性。

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1515

植物根系活力檢測試劑盒

反應(yīng)

15

實驗結(jié)果展示:

實驗流程:

1. 檢測準(zhǔn)備工作:

1.1. TTF系列標(biāo)準(zhǔn)管配制:根據(jù)需要,進行梯度稀釋(例如稀釋至25、50、100、150、200、400μg),與待測樣品進行后續(xù)檢測后,用于標(biāo)準(zhǔn)曲線法數(shù)據(jù)分析;

1.2.準(zhǔn)備樣品:取0.2~0.5g植物須根系,洗凈,用濾紙吸干,完全浸沒于TTC Assay buffer工作液中,37℃避光孵育1~3h,加入2ml TTC終止液終止反應(yīng);同時做一空白對照實驗,即根系先完全浸沒于2ml TTC終止液以殺死根樣,再加入10ml TTC Assay Buffer工作液,37℃避光孵育1~3h。取出充分研磨或勻漿,以提取出TTF,把紅色提取液(TTF)轉(zhuǎn)移至離心管,并用少量乙酸乙酯把殘渣洗滌2~3次,再將洗滌液一并轉(zhuǎn)移至離心管,最后補加乙酸乙酯至10ml,搖勻。

1.3測定:比色杯光徑1.0cm,系列標(biāo)準(zhǔn)管以“0”號管調(diào)零,測定1~5號管485nm的吸光度值;樣品管以空白對照組樣品提取液做參比,調(diào)零,以分光光度計或酶標(biāo)儀測定實驗組樣品提取液在485nm的吸光度值。

實驗結(jié)果:全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準(zhǔn)確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后,用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃,3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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