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植物過(guò)氧化物酶(POD)(檢測(cè)服務(wù))

植物過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè)試劑盒(愈創(chuàng)木酚微板法)檢測(cè)原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,在酶促反應(yīng)的最適條件下采用每隔一定時(shí)間測(cè)定產(chǎn)物生成量的方法,于酶標(biāo)儀470nm處測(cè)定吸光度,以吸光度變化所需酶量進(jìn)行計(jì)算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶活性,尤其適用于測(cè)定水果中過(guò)氧化物酶活性。

價(jià)格:¥15.00

規(guī)格:反應(yīng)

貨號(hào):ST1480

品牌:LEAGENE

服務(wù)介紹:

      植物過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè)試劑盒(愈創(chuàng)木酚微板法)檢測(cè)原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,在酶促反應(yīng)的最適條件下采用每隔一定時(shí)間測(cè)定產(chǎn)物生成量的方法,于酶標(biāo)儀470nm處測(cè)定吸光度,以吸光度變化所需酶量進(jìn)行計(jì)算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶活性,尤其適用于測(cè)定水果中過(guò)氧化物酶活性。

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格

ST1480

植物過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè)試劑盒

反應(yīng)

15

實(shí)驗(yàn)流程:

1、 準(zhǔn)備樣品:

植物樣品:取0.5-1.0g植物組織或水果中層果肉加入4ml預(yù)冷的POD Lysis Buffer研磨或勻漿,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,即為POD粗提液

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測(cè)定,-20℃凍存,用于過(guò)氧化物酶的測(cè)定。

細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如有必要用POD Lysis Buffer進(jìn)行適當(dāng)勻漿,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,即為POD粗提液,

高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的過(guò)氧化物酶,可以使用POD Lysis Buffer進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2、 配制POD Assay Buffer工作液:取適量的POD氧化劑和POD Assay Buffer,按POD氧化劑:POD Assay Buffer=1:14混合,

3、 POD加樣:取96孔板,按照下表設(shè)置對(duì)照孔孔、測(cè)定孔,注意:對(duì)照孔、測(cè)定孔中為同一待測(cè)樣品,但對(duì)照孔中是提前加熱煮沸5min的樣品

加入物(μl)

對(duì)照孔

測(cè)定孔

待測(cè)樣品

5(提前煮沸5min)

5

POD Lysis Buffer

145

145

POD Assay Buffer工作液

100

100

 4、 POD測(cè)定:立即以酶標(biāo)儀,以對(duì)照孔為對(duì)照,測(cè)定470nm處測(cè)定孔的吸光度(A測(cè)定0);37℃準(zhǔn)確孵育3min后,立即加入5μl POD終止液終止反應(yīng)(備選方案),以對(duì)照孔為對(duì)照,以酶標(biāo)儀測(cè)定470nm處測(cè)定孔的吸光度(A測(cè)定1)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求:

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機(jī)械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜(GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過(guò)夜取血清)后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測(cè)。

3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測(cè)。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后,用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來(lái),將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃,3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗(yàn),或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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