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手動(dòng)生化

服務(wù)詳情

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淀粉酶(AMS)(檢測服務(wù))

淀粉酶(AMS)檢測試劑盒(碘-淀粉比色法)其檢測原理是血清或血漿等樣品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘液與未被水解的淀粉結(jié)合生成藍(lán)色復(fù)合物,其藍(lán)色深淺與未經(jīng)酶促反應(yīng)的空白比較,可計(jì)算出淀粉酶的活力單位,通過分光光度計(jì)檢測660nm處吸光度,可用于檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液等樣品中內(nèi)源性的淀粉酶活性。

價(jià)格:¥15.00

規(guī)格:反應(yīng)

貨號(hào):ST1450

品牌:LEAGENE

服務(wù)介紹:

       淀粉酶(AMS)檢測試劑盒(碘-淀粉比色法)其檢測原理是血清或血漿等樣品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘液與未被水解的淀粉結(jié)合生成藍(lán)色復(fù)合物,其藍(lán)色深淺與未經(jīng)酶促反應(yīng)的空白比較,可計(jì)算出淀粉酶的活力單位,通過分光光度計(jì)檢測660nm處吸光度,可用于檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液等樣品中內(nèi)源性的淀粉酶活性。

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格

ST1450

淀粉酶(AMS)檢測試劑盒

反應(yīng)

15

實(shí)驗(yàn)流程:

1、 準(zhǔn)備樣品:

①細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-20℃凍存,用于AMS的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水5~10倍稀釋后可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常用生理鹽水10~20倍稀釋后直接用于測定,-20℃凍存,但為了消除樣品本身顏色的干擾,需設(shè)置加了樣品但不加底物的對(duì)照。

③高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的AMS,可使用生理鹽水或PBS等進(jìn)行稀釋。

④樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度(mg/ml),以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的AMS含量。

2、 AMS加樣:按照下表設(shè)置空白管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入

加入物(ml)

測定管

空白管

AMS Assay Buffer

0.5

0.5

37℃孵育5min。

待測樣品

0.1

混勻,置于37℃水浴,準(zhǔn)確孵育7.5min。

KI工作液

0.5

0.5

蒸餾水

3.0

3.1

      3、 AMS測定:輕輕混勻,蒸餾水調(diào)零,分光光度計(jì)(比色杯光徑1cm)測定660nm處吸光度(記為A測定和A空白)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

全自動(dòng)生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求:

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機(jī)械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液進(jìn)行測定。

2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜(GLU檢測請(qǐng)勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后,用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃,3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗(yàn),或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

 僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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