外源基因導入真核細胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉染法、DEAE-葡聚糖轉染法、脂質體法、電穿孔法、顯微注射法等。Leagene磷酸鈣法細胞轉染試劑盒(Calcium Phosphate Cell Transfection Kit)是在傳統(tǒng)的磷酸鈣細胞轉染方法的基礎上進行了改良,提高了轉染效率,并降低了毒性,可用于磷酸鈣法轉染細胞,不僅可以瞬時表達,也可以篩選穩(wěn)定株,HEK293是最適合磷酸鈣法轉染的細胞之一,優(yōu)化條件后轉染效率可以高達85%以上,一般的轉染效率可達40~50%左右;其他常見細胞(例如Hela、CHO細胞等)也適合磷酸鈣法轉染,但效率比293細胞要略低一些。
Leagene磷酸鈣法細胞轉染試劑盒主要適合于大多數貼壁細胞的轉染,也可于一些懸浮細胞的轉染,一般要求DNA濃度在10~50μg為宜,Hela、BALB等細胞沉淀放置16h,CHO、DUKX、BⅡ等細胞可以通過甘油、DMSO進行熱休克處理以提高轉染效率。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。